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PEI轉(zhuǎn)染的原理與使用操作方法
2024-10-25 PEI轉(zhuǎn)染是目前工業(yè)化、大規(guī)模瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)重組蛋白或病毒載體領(lǐng)域使用廣泛的基因載體和轉(zhuǎn)染試劑。PEI是一種帶有高電荷陽(yáng)離子的多聚物，極易與帶負(fù)電荷的DNA分子結(jié)合，形成復(fù)合物。在HEK293和CHO等細(xì)胞中，采用PEI轉(zhuǎn)染法能夠獲得較高的轉(zhuǎn)染效率，尤其適用于大規(guī)模的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染表達(dá)實(shí)驗(yàn)。相較于磷酸鈣法，PEI轉(zhuǎn)染試劑制備更加簡(jiǎn)便，適用于更多種類的細(xì)胞，并且具有更高的性價(jià)比。與脂質(zhì)體等轉(zhuǎn)染試劑相比，PEI轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞的毒性較小。對(duì)于難以進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞而言，利用PEI進(jìn)行慢病毒包裝...
ROS活性氧試劑盒原理、應(yīng)用與操作指南
2024-10-25 ROS作為生物體內(nèi)一類重要的信號(hào)分子，其水平的變化與多種生理和病理過(guò)程密切相關(guān)。因此，準(zhǔn)確、高效地檢測(cè)ROS水平對(duì)于科學(xué)研究具有重要意義。ROS活性氧試劑盒正是一種用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)ROS水平的實(shí)驗(yàn)工具，下面將對(duì)其原理、應(yīng)用及操作方法進(jìn)行詳細(xì)介紹。一、試劑盒原理ROS活性氧試劑盒的核心原理主要基于熒光探針?lè)ǎ渲谐Ｓ玫氖抢枚榷錈晒馑?乙酰乙酸酯(DCFH-DA)作為熒光探針。DCFH-DA本身無(wú)熒光且能自由穿過(guò)細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞后，被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不...
無(wú)血清培養(yǎng)基：提高細(xì)胞培養(yǎng)可控性的關(guān)鍵
2024-10-16 無(wú)血清培養(yǎng)基是一種在生物技術(shù)中廣泛使用的細(xì)胞培養(yǎng)基，其特點(diǎn)是不包含動(dòng)物血清成分。這種培養(yǎng)基通過(guò)優(yōu)化營(yíng)養(yǎng)成分、添加適量的生長(zhǎng)因子和激素等手段，為細(xì)胞提供了一個(gè)更為純凈、穩(wěn)定的生長(zhǎng)環(huán)境。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，無(wú)血清培養(yǎng)基在提高可控性方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。一、無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)避免血清批次差異：動(dòng)物血清的來(lái)源和質(zhì)量往往存在較大的差異，這可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不穩(wěn)定。無(wú)血清培養(yǎng)基通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化、可控的成分配置，避免了血清批次差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，從而提高了實(shí)驗(yàn)的可靠性和重復(fù)性。提高細(xì)胞分化可控性：...
鬼筆環(huán)肽染色原理（Alexa Fluor 488 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽使用方法）
2024-10-15 鬼筆環(huán)肽是一種雙環(huán)七肽毒素，它能選擇性的與動(dòng)植物體內(nèi)的纖維狀的肌動(dòng)蛋白(F-actin)結(jié)合，這種特殊的選擇性使之成為研究細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)蛋白微絲(F-actin)的有力工具。在光學(xué)顯微鏡下,熒光標(biāo)記過(guò)的鬼筆環(huán)肽(phalloidin-dyeconjugate)可以清晰地顯示出細(xì)胞內(nèi)微絲的形態(tài)和分布，廣泛被應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)的研究當(dāng)中。鬼筆環(huán)肽染色原理熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽在納克水平就可與F-actin選擇性的結(jié)合并且易溶于水，為檢測(cè)組織切片，培養(yǎng)細(xì)胞和無(wú)細(xì)胞體系中的actin的定位和定量...
紅細(xì)胞裂解液的原理說(shuō)明與使用方法
2024-10-12 紅細(xì)胞裂解液是一種去除紅細(xì)胞簡(jiǎn)便易行的方法，即用裂解液裂解紅細(xì)胞，它既不損傷有核細(xì)胞又能充分的去除紅細(xì)胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細(xì)胞去除方法，主要用于經(jīng)酶消化分散的組織細(xì)胞的分離純化，淋巴細(xì)胞的分離純化以及組織細(xì)胞蛋白與核酸提取等實(shí)驗(yàn)中紅細(xì)胞的去除。原理說(shuō)明利用細(xì)胞內(nèi)外的離子濃度差異，形成滲透壓差，外部的水分會(huì)擴(kuò)散至細(xì)胞內(nèi)，使紅細(xì)胞膨脹，達(dá)到裂解的效果。使用方法1.裂解紅細(xì)胞(1)向1份待裂解的新鮮全血中加入3倍體積的紅細(xì)胞裂解液（如1mL新鮮全血加入3mL紅細(xì)胞裂解液...
不同細(xì)胞的凍存液配制比例（凍存液配置注意事項(xiàng)）
2024-10-11 細(xì)胞凍存液是用于在低溫環(huán)境下保存細(xì)胞的一種特殊溶液，其主要目的是保護(hù)細(xì)胞在冷凍和解凍過(guò)程中免受損傷。細(xì)胞凍存液通常包含滲透性和非滲透性保護(hù)劑，如二甲基亞砜（DMSO）和甘油，這些成分可以滲透到細(xì)胞內(nèi)部，降低細(xì)胞內(nèi)外的電解質(zhì)濃度，防止細(xì)胞內(nèi)水分外滲，從而減少冰晶的形成。細(xì)胞凍存液配置概述常用的細(xì)胞凍存液配比為培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1，適用于多數(shù)細(xì)胞系，能夠保證細(xì)胞在凍存過(guò)程中有較高的存活率。需要長(zhǎng)時(shí)間保存或者具有特別珍貴性的細(xì)胞系調(diào)整為血清：DMSO的比例=9:1，這...
支原體清除劑可以和雙抗一起用嗎
2024-10-11 不得與除青鏈霉素雙抗外其它抗生素混用。李記生物QuickCell支原體清除劑（1000X），通過(guò)抑制支原體DNA回旋酶活性，進(jìn)而有效抑制支原體DNA的復(fù)制，從遺傳物質(zhì)著手殺滅支原體，讓細(xì)胞擺脫支原體污染的困擾，確保驗(yàn)結(jié)果的可信度。主要用于清除細(xì)胞、血清、培養(yǎng)基中的支原體，整個(gè)過(guò)程僅需3-5d即可；本產(chǎn)品能夠清除大部分種類的支原體，而對(duì)細(xì)胞本身無(wú)毒。李記已驗(yàn)證上百種細(xì)胞，如：小鼠胚胎干細(xì)胞或iPS細(xì)胞、人胚胎干細(xì)胞或iPS細(xì)胞、HEK293、Hela、HepG2、HCT116、...
原代細(xì)胞凍存液在生物醫(yī)學(xué)研究中的重要性
2024-09-27 在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域，細(xì)胞是重要的研究對(duì)象，尤其是原代細(xì)胞——直接從活體組織中提取的未經(jīng)過(guò)人工傳代培養(yǎng)的細(xì)胞，更是珍貴的實(shí)驗(yàn)資源。然而，如何在保證細(xì)胞活性的同時(shí)進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存，成為了科研工作者面臨的重大挑戰(zhàn)之一。這時(shí)，“原代細(xì)胞凍存液”應(yīng)運(yùn)而生，它不僅解決了這一難題，還極大地推動(dòng)了細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展進(jìn)程。原代細(xì)胞凍存液是一種專門用于低溫條件下保護(hù)細(xì)胞免受冷凍傷害的特殊溶液。其核心成分主要包括：DMSO（二甲基亞砜）：作為一種滲透性抗凍劑，DMSO能夠進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，替代水分子，防止冰...

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