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  • 影響細胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些

    2021-02-22 細胞培養(yǎng)(cellculture)是指在體外模擬體內環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術,在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不論對于整個生物工程技術,還是其中之一的生物克隆技術來說,細胞培養(yǎng)都是一個*的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)??寺?。細胞培養(yǎng)技術可以由一個細胞經過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術*的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。細胞培養(yǎng)技術是細胞生...
  • 選用牛血清白蛋白BSA需要考慮哪些問題

    2020-12-12 牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質結合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機械保護作用和載體作用。牛血清白蛋白BSA,又稱第五組分...
  • 關于牛血清白蛋白BSA的知識你了解多少

    2020-12-10 牛血清白蛋白BSA,又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,例如在westernblot中作為Blockingagent。它是牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/100ml),分子量68kD。等電點4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱氨酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自...
  • 哪些因素影響了高保真DNA聚合酶的保真度?

    2020-10-22 高保真DNA聚合酶的保真度是指準確復制目的模板的結果。具體來說,這涉及到多個步驟,包括讀取模板鏈,選擇正確的三磷酸核苷,并將此核苷酸插入3’引物末端的能力。為了區(qū)分正確和錯誤的核苷酸,一些DNA聚合酶具有3’到5’核酸外切酶活性。這種“校正”活性可切除不正確摻入的單核苷酸,并將其替換成正確的核苷酸。高保真PCR使用摻入錯誤率低且具有校正活性的DNA聚合酶,以保證目的DNA的忠實復制。在設計PCR實驗時,你首先要考慮你的應用是否需要高保真聚合酶。如果實驗結果依賴于正確的DNA序...
  • 如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產品質量受損?

    2020-08-24 胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產品質量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋...
  • 溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具

    2020-06-27 溶酶體染色試劑盒對于懸浮細胞,取10~60萬細胞,重懸于0.5mL細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅加入0.5mLJC-1染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20分鐘。在孵育期間,按照每1mLJC-1染色緩沖液(5×)加入4mL蒸餾水的比例,配制適量的JC-1染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。37℃孵育結束后,600g4℃離心3~4分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具,用來標記亞細胞,細胞器;例如細胞膜、溶酶體、...
  • 細胞培養(yǎng)中馬血清的作用有哪些

    2020-06-19 馬血清采自健康馬血液為原料,封閉系統(tǒng)內無菌采血,微孔過濾而成,性狀為澄清液體,無噬菌體、超低內毒素,無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等,促細胞生長繁殖效果佳,適用于細胞、組織器官培養(yǎng)、細胞株保藏、單抗研制,是醫(yī)院、科研院校、動物疫苗、生物制藥廠家重要培養(yǎng)基之一。細胞在單純的培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類型的細胞培養(yǎng)中必須提供某些營養(yǎng)物質和生長因子才能是細胞得以生長并維持生長狀態(tài)?;A培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5-20%。特殊用途的血清來源需用經驗確定。廣泛應用的...
  • 說一說胎牛血清在細胞培養(yǎng)研究中的重要作用

    2020-05-18 胎牛血清采用心臟封閉穿刺的方法采自孕6~8月孕齡的健康母牛腹中的胎牛。通過生物材料合成吸附技術和低溫進行前期處理,去除細菌、病毒、支原體、抗體等影響血清質量的因素,然后再在凈化車間中進行過濾分裝。胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。要說為什么很多細胞培養(yǎng)的科研人都用到胎牛血清,那就不得不說說胎牛血清那極為重要的作用。1.提供維持細...
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