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胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異有哪些
2021-09-26
胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清,因其未與外界環(huán)境接觸,所以血清內(nèi)IgG等免疫因子相對含量較少,適合用于免疫類細(xì)胞的培養(yǎng)。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先,胎牛血清總蛋白含量(g/dl)約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達(dá)8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個血清是否為胎?;蛐律Q?,蛋白含量越高說明牛齡越大,目前檢測蛋白含量是初步檢測一項重...
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常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
2021-08-29
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類,一類是瞬時轉(zhuǎn)染,一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細(xì)胞中可存在多個拷貝數(shù),產(chǎn)生高水平的表達(dá),但通常只持續(xù)幾天,多用于啟動子和其它調(diào)控元件的分析。一般來說,超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高,在轉(zhuǎn)染后24-72小時內(nèi)(依賴于各種不同的構(gòu)建)分析結(jié)果,常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫...
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一文帶你了解關(guān)于細(xì)胞增殖的知識
2021-08-27
一、什么是細(xì)胞增殖細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。單細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。二、細(xì)胞增殖的意義和方式意義:細(xì)胞增殖是生活細(xì)胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細(xì)胞的增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ)。方式:真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
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預(yù)染蛋白Marker和未預(yù)染蛋白Marker有哪些不一樣
2021-07-27
在Western實驗中,蛋白Marker可以監(jiān)控蛋白質(zhì)在SDS-PAGE中的遷移,監(jiān)控蛋白的轉(zhuǎn)膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預(yù)染的Marker,即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn),高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn);另一種是預(yù)染的Marker,即單色預(yù)染和多色預(yù)染。一、未預(yù)染蛋白Marker未預(yù)染的蛋白Marker是簡單,也是最準(zhǔn)確的一種,由于沒有附帶染料分子或者標(biāo)記大小正好是蛋白原本的大小...
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如何避免胎牛血清使用時出現(xiàn)黑點
2021-06-27
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細(xì)胞培養(yǎng)順利。(1)盡可能地減少血清凍融次數(shù)。(...
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這樣做能防止胎牛血清產(chǎn)生沉淀
2021-05-30
沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍...
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帶你了解細(xì)胞凋亡檢測試劑盒的知識
2021-04-19
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失,細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈均一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時細(xì)胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細(xì)胞變成數(shù)個大小不等的有膜...
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液體培養(yǎng)基接種要注意的事項有哪些
2021-02-24
液體培養(yǎng)基,固體培養(yǎng)基的對應(yīng)詞,是微生物或動植物細(xì)胞的液狀培養(yǎng)基。它具有進(jìn)行通氣培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的優(yōu)點。在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細(xì)胞的周圍,形成透過養(yǎng)分的壁障,養(yǎng)分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細(xì)胞生長,提高生產(chǎn)量。液體培養(yǎng)基接種要注意的事項有哪些:①用酒精棉消毒操作臺面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側(cè),靠近酒精燈放置。將需要進(jìn)行液體轉(zhuǎn)接的試管插在試管架上,置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調(diào)至合適的刻度放于右手附近的架子上...