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如何選擇核酸染料
2022-05-27
科研人員還在為如何選擇核酸染料而煩惱嗎？帶您認(rèn)識(shí)幾款優(yōu)秀的核酸染料一、李記GelRed,李記GelGreen——李記生物研發(fā)的兩款核酸染料。據(jù)不*統(tǒng)計(jì)，有強(qiáng)烈致癌、致畸作用的EB染料仍以90%的優(yōu)勢(shì)占據(jù)核酸染料使用量多，在眾多的EB替代染料中，名氣最大的要數(shù)Life公司的SYBR系列、美國(guó)Biotium公司的GelRed,GelReen染料，其他替代染料要么是EB,吖啶橙改名，要么是國(guó)內(nèi)不成熟的仿品，安全性毫無(wú)保障。Life公司的SYBRGreen,SYBRGoad,SYBR...
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細(xì)胞增殖及細(xì)胞活力檢測(cè)方法
2022-05-25
一、細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性細(xì)胞增殖是活細(xì)胞的重要?理功能之?，細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性檢測(cè)所用的方法相近，但實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?。?xì)胞增殖是通過(guò)細(xì)胞增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)判斷細(xì)胞的數(shù)量變化，例如細(xì)胞計(jì)數(shù)法，反應(yīng)的就是細(xì)胞真實(shí)的數(shù)量。而細(xì)胞活性檢測(cè)，則是通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞受到藥物或其他措施處理后，標(biāo)志物產(chǎn)量或濃度的變化，進(jìn)而判斷藥物或處理措施的作用，細(xì)胞活性檢測(cè)所得結(jié)論，往往反映了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的。細(xì)胞增殖檢測(cè)，因檢測(cè)標(biāo)志物的不同，目前大致分為四類(lèi)：DNA合成檢測(cè)、代謝活性檢測(cè)、細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測(cè)和ATP濃度...
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蛋白保存方法，你知道多少
2022-05-24
生物大分子的貯藏保存可分為干態(tài)和液態(tài)貯藏兩種。蛋白質(zhì)失活受多種理化因素的影響，主要有空氣、溫度、水分、光線(xiàn)、酸堿度、樣品狀態(tài)、微生物活動(dòng)、保存時(shí)間和容器等。這些因素可單獨(dú)起作用，但更多情況是協(xié)同作用?？偟膩?lái)說(shuō)，蛋白質(zhì)的保存主要考慮其構(gòu)型穩(wěn)定、活性中心的保護(hù)、避免輔助因子喪失等，以防止其變性、解聚或降解。由于溫度和水分對(duì)蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性影響很大，故蛋白質(zhì)最好是低溫、冷凍或冷凍干燥后低溫干燥保存。1.液態(tài)保存(1).在低溫下保存蛋白質(zhì)對(duì)熱敏感，溫度越高，穩(wěn)定性越差。因此，低溫保存蛋...
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牛血清白蛋白BSA在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用
2022-04-26
牛血清白蛋白（BovineSerumAlbumin,BSA）是牛血清中的一種球蛋白，又稱(chēng)第五組分（需要注意的是，第五組分并不是BSA的一種組份，而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份，其中第五種就是白蛋白），CAS號(hào)為9048-46-8，包含583個(gè)氨基酸殘基，分子量為66.430kDa，等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用，無(wú)免疫球蛋白IgG牛血清白蛋白產(chǎn)品血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營(yíng)養(yǎng)作用...
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介紹重組腸激酶的使用注意事項(xiàng)
2022-04-24
重組腸激酶（Enterokinase,lightchain）是一種高度專(zhuān)一性識(shí)別Asp-Asp-Asp-Asp-Lys序列的蛋白酶，在Lys的C端水解多肽。它可以將胰蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)橐让福部梢詫в羞@個(gè)識(shí)別序列的融合蛋白切開(kāi)。由于腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)用于基因工程產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，其應(yīng)用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂，尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等研究。腸激酶具有高度專(zhuān)一性，水解效率高的特點(diǎn)，它被廣泛地應(yīng)...
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細(xì)胞凍存液分類(lèi)與選擇
2022-04-24
細(xì)胞凍存是細(xì)胞生物學(xué)研究及藥物研發(fā)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中需要經(jīng)常面對(duì)的常規(guī)操作。隨著細(xì)胞越來(lái)越嬌，人工越來(lái)越貴，各種細(xì)胞凍存液應(yīng)運(yùn)而生，如何從名目繁多的細(xì)胞凍存液中選擇變成一個(gè)問(wèn)題。本文從細(xì)胞凍存液分類(lèi)，應(yīng)用場(chǎng)景，使用效果等多方面加以闡釋?zhuān)Ｍ軐?duì)如何選擇細(xì)胞凍存液有所助益。一、細(xì)胞凍存液的分類(lèi)從成分劃分（1）滲透性和非滲透性滲透性保護(hù)劑分子量小可滲透到細(xì)胞內(nèi)，如甘油、DMSO、乙二醇等，其在細(xì)胞冷凍存*凝固之前，滲入細(xì)胞內(nèi)，降低細(xì)胞內(nèi)外溶液中的電解質(zhì)濃度，阻止細(xì)胞內(nèi)水分外滲，避免細(xì)胞過(guò)...
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細(xì)胞凍存液原理及配制方法
2022-04-22
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建系中，及時(shí)凍...
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PEI轉(zhuǎn)染試劑是非常有潛力的非病毒質(zhì)粒載體試劑
2022-03-28
分子生物學(xué)的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定，科學(xué)家在這些研究成果的基礎(chǔ)上發(fā)展了基因治療?；蛑委熓抢没蜉d體將治療基因?qū)牖颊唧w內(nèi)，進(jìn)而表達(dá)功能蛋白以達(dá)到治療的目的?；蛑委焸鬟fDNA面臨的挑戰(zhàn)之一是外源治療基因會(huì)被體液和胞外空間的核酸內(nèi)切酶降解。治療基因在目標(biāo)組織中的選擇性積累、細(xì)胞內(nèi)化以及從溶酶體逃逸這些問(wèn)題對(duì)所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細(xì)胞核以允許獲得轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。因此，設(shè)計(jì)和制備安全高效的基因載體來(lái)壓縮并且保護(hù)治療基因以免被核酸內(nèi)切酶降解并延長(zhǎng)其在體內(nèi)的...
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