溶酶體染色試劑盒的基礎(chǔ)知識，一起學(xué)習(xí)吧！
更新時間：2018-10-12 點擊次數(shù)：2778
本試劑盒可以用于酶標版、免疫組化和流式細胞技術(shù)等應(yīng)用，用于多種不同類型的研究中，包括細胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細胞活性、細胞凋亡和細胞毒性的研究，適用于增殖型和非增殖型細胞，也可以用于懸浮和貼壁細胞。
溶酶體染色試劑盒使用方法，準備溶酶體染色試劑盒，室溫避光放置5-10分鐘預(yù)熱LysoBrite NIR染料Component A取20µL預(yù)熱好的LysoBrite NIR染料(Component A)，用10 mL活細胞染色緩沖液Component B進行稀釋。注意，20μL LysoBrite NIR染料(Component A)足夠完成1塊96孔板實驗，剩余的LysoBrite NIR染料(Component A) 可以根據(jù)需要分裝避光保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。優(yōu)染料濃度根據(jù)具體應(yīng)用會有不同，染色條件根據(jù)細胞類型、細胞或組織的染料滲透性不同可以進行調(diào)整優(yōu)化。
溶酶體染色試劑盒細胞染色，貼壁細胞：在96孔板（100μL）或培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)細胞，當細胞達到70-80%融合度，在96孔板或培養(yǎng)皿內(nèi)添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用 Cy5濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察。
溶酶體染色試劑盒是一類熒光成像工具，用來標記亞細胞，細胞器；例如細胞膜、溶酶體、線粒體和細胞核等。Cell Navigator系列細胞器或亞細胞結(jié)構(gòu)標記試劑盒提供全的細胞及相關(guān)細胞器熒光標記方案，每種檢測方案均能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光檢測方法。這種的細胞標簽為從空間上和時間上研究發(fā)生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。注意，如果細胞沒有充分染色，可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善。懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養(yǎng)液5分鐘，棄去上清，用預(yù)熱好的細胞培養(yǎng)液溫和的重懸細胞，然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用 Cy5濾光片在顯微鏡下進行熒光觀察。
溶酶體染色試劑盒可以標記活細胞中的溶酶體，使之帶紅色熒光(Ex/Em =636/650 nm)。本試劑盒使用染料為一種疏水性復(fù)合物，屬趨溶酶體染料，染料滲透進入完整的活細胞中，有選擇性進入溶酶體，并因溶酶體膜內(nèi)外的不同pH環(huán)境而被鎖定在溶酶體中。染料一旦進入溶酶體中，熒光顯著性增強并非常穩(wěn)定。
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